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考马斯亮蓝法测定蛋白质含量流程：

该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精que的，但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0．2%影响测定结果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。

1．Bradford浓染液的配制：将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 95%乙醇，加入100ml85%的磷酸，然后，用蒸馏水补充至1000ml，此染液放4℃至少6个月保持稳定。

2．标准曲线蛋白质样本的准备：尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品，例如测定抗ti，可用纯化的抗ti作为标准。如果待测样本是未知的，也可用抗ti作为标准蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之间绘制标准曲线。

3．将待测样本溶于缓冲溶液中，该缓冲溶液应与制作标准曲线的缓冲溶液相同(hao用PBS)。

4．按1：5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液，如出现沉淀，过滤除去。

5．每个样本加5ml稀释的染料结合溶液，作用5～30min。染液与蛋白质结合后，将由红色变为蓝色，在595nm波长下测定其吸光度。注意，显色反应不得超过30min．

6．根据标准曲线计算待测样本的浓度。

亮蓝

亮蓝，又名食用蓝色1号(日本)、食用蓝色2号，属水溶性非偶氮类着色剂。分子式C37H34N2Na2O9S3，相对分子质量792.86。亮蓝为食用蓝色色素,属于人工合成色素,是由邻磺酸与N--N- (3-磺基苄基)-经缩合、氧化而制得的。属于偶氮类化合物。可在食品、药品、化妆品等行业中作着色剂用。食品行业中适用于糕点、糖果、饮料等的着色。

中文名称

亮蓝

性质

带有金属光泽的红紫色颗粒或粉末

特点

无臭，水溶液呈蓝色

别名

酸性艳蓝G

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基本介绍

中文名：亮蓝

别名：酸性蓝 90；酸性艳蓝G；亮蓝；考马斯亮兰G250；考马斯亮蓝G250；Brilliant Blue鍳；亮蓝G；考马斯亮蓝G-250生物染色剂

英文名：Acid Blue 90

化学式：C47H48N3NaO7S2

CAS号：6104-58-1

MDL：MFCD00012141

摩尔质量：854.02

外观：带金属光泽的深紫至青铜色颗粒或粉末

安全术语S24/25Avoid contact with skin and eyes.避免与皮肤和眼睛接触。风险术语R33Danger of cumulative effects.有累积效应的危险品。

亮蓝，又名食用蓝色1号（日本）、食用蓝色2号，属水溶性非偶氮类着色剂。分子式C37H34N2Na2O9S3，相对分子质量792.86。亮蓝为食用蓝色色素,属于人工合成色素,是由邻磺酸与N--N- (3-磺基苄基)-经缩合、氧化而制得的。属于偶氮类化合物。可在食品、药品、化妆品等行业中作着色剂用。食品行业中适用于糕点、糖果、饮料等的着色。